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人胚胎眼鞏膜成纖維細胞 
人胚胎眼鞏膜成纖維細胞
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簡稱 : HFSF
種屬 :
貨號 : E1802
價格 :
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培養基 : DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS ?
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細胞名稱:人胚胎眼鞏膜成纖維細胞

形態特性:成纖維細胞樣

生長特性:貼壁生長 

特征特性:北京眼科研究所建系。

培養條件: DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法: 1:2~1:3傳代;3~4天1次。

傳代情況: P5

凍存條件:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 

產品名稱

人胚胎眼鞏膜成纖維細胞

英文簡稱

HFSF

狀態

貼壁

細胞冷凍保存:

1.凍存液:92%完全培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。

細胞培養的操作步驟:

1.人胚胎眼鞏膜成纖維細胞吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;

(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3.加入6-8ml完全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;

4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。


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